본 발명은 금속 나노입자를 이용한 옥시도리덕타제 보조인자의 전기화학적 재생방법에 관한 것으로, 3-전극 시스템을 구비한 반응기 내에서 산화형의 옥시도리덕타제 보조인자를 메틸비올로겐, 루테늄 II 복합체 및 로듐 III 복합체로 구성되는 군으로부터 선택되는 어느 1종 이상의 1차 산화환원 매개체; 및 2차 산화환원 매개체인 금속 나노입자 존재 하에 전기화학적으로 환원형의 옥시도리덕타제 보조인자로 변환시켜 재생하는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 금속 나노입자는 상기 재생방법에 있어서, 2차 산화환원 매개체이자 촉매로 작용하여 옥시도리덕타제 보조인자의 재생 속도를 상승시키는 효과를 나타내는 바, 옥시도리덕타제 효소를 이용하는 다양한 생촉매반응의 효율을 높이는데 매우 유용하게 사용될 수 있다. 옥시도리덕타제, 보조인자, 조효소, 금속나노입자, (헥사메틸벤젠-2,2′-비피리딘클로로)루테늄(II), 펜타메틸사이클로펜타디에닐-2,2'-비피리딘클로로)로듐(III), 전기화학적 방법, 생촉매반응